Zestaw ELISA do oznaczania alergenów – ryby

Zestaw testowy ELISA na białko ryby jest mikropłytkowym testem ELISA typu sandwich, używanym do ilościowej analizy niskich poziomów resztek ryb w produktach spożywczych, składnikach, płukankach do czyszczenia w miejscu (CIP) oraz próbkach środowiskowych w formacie 96-dołkowym. Ilość białka w próbce można określić na podstawie krzywej standardowej, skonstruowanej z użyciem standardów o znanym stężeniu i dostosowanej do rozcieńczenia próbki.

Zestaw ELISA na białko ryby wykorzystuje metodę ELISA typu sandwich. Docelowe białko obecne w próbce reaguje ze specyficznymi przeciwciałami, które zostały adsorbowane na powierzchni dołków mikropłytkowych polistyrenowych. Po usunięciu niezwiązanych białek przez płukanie, dodawane są przeciwciała sprzężone z peroksydazą chrzanową (HRP). Przeciwciało oznaczone enzymatycznie tworzy kompleksy z wcześniej związanym białkiem docelowym. Po drugim etapie płukania enzym związany z immunosorbentem jest wykrywany przez dodanie substratu chromogennego, 3,3’,5,5’-tetrametylobenzydyny (TMB). Rozwój koloru w wyniku tej reakcji enzymatycznej jest bezpośrednio proporcjonalny do stężenia białka docelowego w badanej próbce; w związku z tym, absorbancja przy 450 nm jest miarą stężenia białka docelowego w próbce testowej. Ilość białka w próbce testowej można określić na podstawie krzywej standardowej, skonstruowanej z użyciem standardów o znanym stężeniu i dostosowanej do rozcieńczenia próbki.